科研动态

遗传发育所高彩霞研究组发表利用CRISPR/Cas9 IVT或RNP实现小麦基因组编辑的方法文章

  •   文章详细阐述了通过基因枪将CRISPR/Cas9 IVT和RNP导入小麦未成熟幼胚实现基因组定点修饰的DNA-free基因组编辑体系。介绍了整个流程包括CRISPR/Cas9 IVT和RNP的制备、编辑活性体外及原生质体验证、基因枪幼胚转化法、突变体群体的快速筛选鉴定等具体方法和实验细节。该方法只需要9-11周即可在T0代就获得不含外源DNA的靶向修饰小麦突变体。由于IVT和RNP是以瞬时表达的方式发挥作用,成功避免外源DNA整合到宿主基因组中而且大大降低脱靶效应。该DNA-free基因组编辑体系的建立将有助于进一步完善作物基因组编辑技术,推进基因组编辑育种产业化进程。 

      该研究成果于2018年2月1日在线发表于Nature Protocols杂志上(DOI:10.1038/nprot.2017.145)。中国科学院大学高彩霞研究组梁振博士研究生(培养单位:中科院遗传与发育生物学研究所)和陈坤玲副研究员为该论文的并列第一作者。相关研究得到科技部、农业部、中科院以及国家自然基金委的资助。 

    责编 :黄巧